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技术详细介绍该成果2006年荣获山东省科技进步二等奖。 对山羊体细胞克隆过程中的卵母细胞成熟、去核和激活等技术环节进行了研究,并在此基础上把胎儿成纤维细胞、皮肤成纤维细胞和卵丘细胞核分别植入由屠宰场卵巢获得的卵母细胞中,组成重构胚移植到受体母羊,成功出生了3只体细胞克隆山羊,主要创新性成果包括:首次研究了山羊卵母细胞秋水仙胺辅助去核,并证明可以用低于猪卵母细胞1000倍的浓度获得90%以上的高去核率,去核率、克隆胚融合率和囊胚发育率都显著高于常规盲吸去核;优化了卵母细胞激活方案,并采用重构胚激活方案培育出生克隆山羊;首次获得以屠宰场山羊卵巢卵母细胞作为核受体、以卵丘细胞和长期培养的胎儿成纤维细胞作为核供体的克隆山羊。 该成果改进和优化了山羊体细胞克隆技术,提高了受核卵母细胞质量,减少了克隆过程对胚胎的损伤,提高了克隆效率,并大大降低了克隆成本。利用该技术分两批获得3只健康的克隆羊,说明该技术具有很好的可重复性。长期培养胎儿成纤维细胞克隆山羊的获得,为通过体细胞克隆技术培育转基因山羊生物反应器打下了基础,具有十分广阔的应用前景。
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