• 技术详细介绍
    本发明公开了一种胃液中piRNA的检测方法,包括胃液抽取和中和、RNA释放、氯仿提取、异丙醇沉淀、乙醇洗涤、RNA逆转录、PCR检测等步骤,该检 测方法使用氢氧化钠溶液,对胃液中的粘稠成分进行液化使粘蛋白和多糖悬于溶液中,并中和胃液;加入胰蛋白酶进行消化,可以使粘蛋白等蛋白质水解,同时使胃 液中的细胞成分变得松散,便于离心分离;加入Trizol溶液反复吹打,RNA充分释放并与多糖和粘蛋白等杂质分离,解决了胃液中酸度、多糖和粘蛋白等对 RNA提取的干扰问题,因此本发明可以去除胃液中多糖和蛋白质等杂质干扰,对胃液中piRNA的有效提取,并对提取的piRNA进行荧光定量PCR检测。