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[00152634]一种土壤微生物cDNA文库的构建方法

交易价格: 面议

所属行业: 其他化学化工

类型: 发明专利

技术成熟度: 正在研发

专利所属地:中国

专利号:201110277886.0

交易方式: 完全转让

联系人: 福建农林大学

所在地:福建 福州市

服务承诺
产权明晰
资料保密
对所交付的所有资料进行保密
如实描述
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技术详细介绍

  本发明提供了一种土壤微生物cDNA文库的构建方法,本发明的构建方法先将总RNA逆转录成单链的cDNA,单链cDNA的5'端经去磷酸化后与5'端磷酸化修饰的接头1连接,再将5'端连有接头的cDNA进行磷酸化反应,反应后的cDNA的3'端与接头2连接,获得5'、3'端分别连接有接头的cDNA,采用与接头部分序列互补的寡核苷酸作为引物对cDNA进行扩增,从而获得土壤微生物的双链cDNA,将此双链cDNA与克隆载体pMD-18T连接后转化大肠杆菌感受态细胞,最终获得土壤微生物的cDNA文库。本发明构建的土壤微生物cDNA文库库容量较大,可以用来筛选感兴趣的目的基因,以及后续的基因、蛋白互作分析。

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