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[00029076]一种高产γ-氨基丁酸重组大肠杆菌/pET-28a-lpgad的构建方法及其应用
联系人： 江南大学
所在地：江苏 无锡市
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技术详细介绍
摘要：一种高产γ-氨基丁酸重组大肠杆菌/pET-28a-lpgad的构建方法及其应用，属于发酵工程中生物技术领域。具体涉及一种构建遗传工程菌的方法、重组酶酶学性质研究及其在转化L-谷氨酸产GABA上的应用。首先，PCR扩增获得植物乳杆菌GB 01-21谷氨酸脱羧酶(GAD)基因，构建了重组质粒pET-28a-lpgad，并在E.coli BL21(DE3)成功表达，其次，粗酶液采用Ni柱亲和层析纯化获得重组GAD，并对其酶学性质进行初步研究，用于指导转化条件的优化。最终5L发酵罐上进行转化实验，GABA累积浓度可达204.5g/L，摩尔转化率为97.92％，为进一步工业化应用打下了良好的基础。
