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[00029119]一种酶活性提高的丙酮酸羧化酶突变体P474N及其应用
联系人： 江南大学
所在地：江苏 无锡市
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技术详细介绍
摘要：本发明公开了一种酶活性提高的丙酮酸羧化酶突变体P474N及其应用，属于遗传工程和发酵工程领域。本发明将米根霉的丙酮酸羧化酶的P474位点突变成了天冬酰胺，得到的突变体酶活提高了12.8％。在敲除PDC1和ADH1的基础上敲除基因FUM1，同时过量丙酮酸羧化酶突变体P474N，发现延胡索酸产量提高了13.3％。同时通过添加64μg/L的生物素，延胡索酸产量达到357mg/L，较不添加生物素时(256.7±3.0mg/L)提高了37％。该发明有效强化了碳代谢流由丙酮酸进入延胡索酸的合成途径，为构建工程酵母高效生产延胡索酸及其它二元羧酸创造了条件，具有很好的工业应用价值和前景。
