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[00029133]一种提高γ-谷氨酰转肽酶催化合成L-茶氨酸的补料策略
联系人： 江南大学
所在地：江苏 无锡市
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技术详细介绍
摘要：一种利用分批添加双底物的方法对重组pMA5-ggt/Bacillus.subtilis分泌的γ-谷氨酰转肽酶催化L-谷氨酰胺和乙胺生成L-茶氨酸的工艺进一步优化，属于发酵工程和酶工程领域。本发明采用前期工作构建的分泌γ-谷氨酰转肽酶的枯草芽孢杆菌，对菌株进行发酵罐培养。浓缩上清粗酶液，应用于茶氨酸的转化。在此基础上，通过分批添加底物实现对转化过程的进一步调控，在含60U/mL酶液的反应体系中，每隔2个小时向其中添加底物谷氨酰胺和乙胺，谷氨酰胺的添加量固定在20mM，供体受体比例控制在1：12时，pH调整为10，18小时后可得到茶氨酸164.2mM，谷氨酰胺转化率达到91.2％。该方法具有操作简单，成本低，茶氨酸产量高，底物转化率高等优点，有利于工业放大生产。
