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[00041340]基于荧光共振能量转移技术的Caspase-8活性检测荧光探针
联系人： 南京大学
所在地：江苏 南京市
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技术详细介绍
本发明涉及一种新的基于荧光共振能量转移技术的Caspase-8活性检测荧光探针，为EBFP2-C8-EGFP，其中，EBFP2和EGFP分别表示增强型蓝色荧光蛋白以及增强型绿色荧光蛋白，C8表示Caspase-8的蛋白酶识别切割位点。本发明还提供了含有该荧光探针的真核表达载体及其构建方法，提供了使用该真核表达载体检测细胞中Caspase-8活性的方法。本发明可在细胞内转染表达该融合荧光探针EBFP2-C8-EGFP，通过测定表达该探针细胞中FRET效率的变化来确定C8酶切位点被切割的效率从而确定细胞中Caspase-8活性的高低，并且通过在流式细胞仪平台上实现了该检测技术，使得这一检测方法能够更加快速、简便、高通量的实现，为Caspase-8抑制剂类药物提供了一个快速、高通量的筛选平台。
