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[00045336]一种聚乙二醇选择性修饰蛋白C端羧基的方法

交易价格: 面议

所属行业:

类型: 发明专利

技术成熟度: 正在研发

专利所属地:中国

专利号:CN201210300769.6

交易方式: 完全转让 许可转让 技术入股

联系人: 中国科学院过程工程研究所

所在地:北京 北京市

服务承诺
产权明晰
资料保密
对所交付的所有资料进行保密
如实描述
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技术详细介绍

摘要:发明涉及一种聚乙二醇(PEG)修饰方法。该方法可以选择性修饰蛋白质和多肽C端的羧基,而且每个蛋白质和多肽分子上仅连接了1个PEG分子。该方法所使用的模型蛋白是葡激酶。PEG修饰的主要步骤为:(1)在偏酸性条件下(pH 5.0),将葡激酶的羧基与胱胺(cystamine)的氨基用碳二亚胺(EDC)进行连接;(2)胱胺所携带的二硫键经还原剂还原后,生成的巯基与单甲氧基PEG-马来酰亚胺(mPEG-Mal)反应。葡激酶C端羧基的pKa值为2.1-2.4,而天冬氨酸与谷氨酸侧链羧基的pKa值分别为3.7-4.0和4.2-4.5。因此,在pH 5.0的条件下PEG可选择性修饰葡激酶的C端羧基。本发明主要用于蛋白质或多肽C端羧基的PEG选择性修饰反应,提供了一种新的PEG修饰方法,其优点在于PEG修饰产物的修饰位点均一性好。

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