
联系人: 中国科学院大连化学物理研究所
所在地:江苏 苏州市
本发明涉及人组织激肽释放酶的提取,是一种基因表达人组织激肽释放酶蛋白的分离纯化方法。操作如下:(1)上清液分离;(2)层析:①台阶梯度洗脱:先用20~30mM、pH7~8的缓冲液平衡柱子,然后上清液泵入柱内;用内含0.1~0.2MNaCl的缓冲液洗脱,然后换内含0.3~0.5MNaCl的缓冲液,收集馏分,备用;先用10~20mM NaAc、pH5.0~6.0平衡柱子,然后台阶梯度洗脱收集馏分;接着用线性梯度洗脱,洗脱液中盐成分范围为0.1M NaCl至0.5M NaCl,收集馏分保存;(3)亲和色谱分离纯化。其优点为:降低了操作成本,适于大规模生产应用;分离效果较好。
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