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[00060012]一种提纯大肠杆菌表达的重组黄曲霉尿酸氧化酶的方法
联系人： 湖北工业大学
所在地：湖北 武汉市
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技术详细介绍
本发明公开了一种从高效表达的基因工程菌中提取重组黄曲霉尿酸氧化酶的方法。该菌是携带重组质粒的大肠杆菌Rosetta(DE3)，该重组质粒是含黄曲霉尿酸氧化酶uricase基因的质粒pET-30c(+)。用该菌生产黄曲霉尿酸氧化酶的方法包括四个步骤：A、工程菌发酵，累积胞内尿酸氧化酶；B、超声波破胞，离心收集上清液（含可溶性尿酸氧化酶）；C、依次进行离子交换层析、疏水层析及凝胶过滤层析，收集活性峰；D、将活性峰冷冻干燥，即得高纯度的重组黄曲霉尿酸氧化酶。本发明的优点：生产重组黄曲霉尿酸氧化酶成本低，酶的表达量高，纯化步骤简便，收率大，纯度高，易于工业化规模生产，具有较大的实际应用价值。
