[00060690]一种胃液中piRNA的检测方法
交易价格:
面议
所属行业:
生物医药
类型:
发明专利
技术成熟度:
正在研发
专利所属地:中国
专利号:201010605793.1
交易方式:
完全转让
联系人:
宁波大学
所在地:浙江 宁波市
- 服务承诺
- 产权明晰
-
资料保密
对所交付的所有资料进行保密
- 如实描述
技术详细介绍
本发明公开了一种胃液中piRNA的检测方法,包括胃液抽取和中和、RNA释放、氯仿提取、异丙醇沉淀、乙醇洗涤、RNA逆转录、PCR检测等步骤,该检
测方法使用氢氧化钠溶液,对胃液中的粘稠成分进行液化使粘蛋白和多糖悬于溶液中,并中和胃液;加入胰蛋白酶进行消化,可以使粘蛋白等蛋白质水解,同时使胃
液中的细胞成分变得松散,便于离心分离;加入Trizol溶液反复吹打,RNA充分释放并与多糖和粘蛋白等杂质分离,解决了胃液中酸度、多糖和粘蛋白等对
RNA提取的干扰问题,因此本发明可以去除胃液中多糖和蛋白质等杂质干扰,对胃液中piRNA的有效提取,并对提取的piRNA进行荧光定量PCR检测。