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[00062014]一种黄粉虫胰蛋白酶样酶基因核苷酸序列及克隆方法
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技术详细介绍
本发明涉及一种黄粉虫胰蛋白酶样酶基因核苷酸序列及克隆方法，属于基因工程技术领域；胰蛋白酶样酶基因核苷酸序列的cDNA序列由869个核苷酸组成，基因编码氨基酸序列为第13-786位核苷酸，终止密码子序列是TAA，位于第787-789位核苷酸，774个核苷酸序列编码258个氨基酸；克隆步骤为黄粉虫总RNA的提取、mRNA的反转录、PCR扩增得到一个基因黄粉虫胰蛋白酶样酶中间保守序列、根据黄粉虫胰蛋白酶样酶中间保守序列设计特异的5’RACE以及3’RACE的下游和上游特异外引物和特异内引物、PCR扩增得到该基因5’端序列以及的3’端序列、将已知的5’端序列和3’端序列拼接得到完整的地鳖虫纤溶酶基因核苷酸序列；采用该方法克隆的质量好，产量高，具有优良的活性物质，应用广泛。
