联系人: 赵运英
所在地:江苏 无锡市
1、简介
葡萄糖二酸是一种重要的化合物,在医疗和工业中有着广泛的应用。目前生产葡萄糖二酸的方法主要以化学法-葡萄糖化学氧化法为主,但该方法具有选择性低、成本高、得率低、要高温及产生大量氧化反应副产物不利于后续葡萄糖二酸的分离等局限性。目前生物法合成葡萄糖二酸主要是在大肠杆菌中进行的,但在大肠杆菌中异源合成葡萄糖二酸被许多因素限制。酿酒酵母因具有耐酸能力强、耐低温、可低pH发酵、没有噬菌体感染、适合大规模发酵、易分离和高抗逆性等特点,已被广泛用于产有机酸的研究,因此酿酒酵母比大肠杆菌更适合葡萄糖二酸的生产并具有更高的工业应用价值。利用酿酒酵母合成葡糖二酸具有很好的应用前景。
2、创新要点
1) 以酿酒酵母BY4741为出发菌株,将拟南芥的肌醇加氧酶MIOX4和丁香假单胞菌的UDH基因在delta重复序位点高效表达,敲除转录抑制因子OPI1获得工程菌Bga-3,该菌株在分批补料发酵条件下能够产6 g/L的葡萄糖二酸,为目前报道的最高值;
2) 通过提高工程菌的转运胞外肌醇的能力和工程菌自身合成肌醇的能力,解决提高葡萄糖二酸产量的关键问题;
3) 进一步协调肌醇用于细胞自身代谢活动和葡萄糖二酸合成之间的分配关系,并通过提高葡萄糖二酸合成途径效率和发酵优化,提高肌醇利用率和葡萄糖二酸合成的产量。
3、关键指标
1)通过合成生物学方法和代谢工程改造酿酒酵母获得可以高产葡萄糖二酸的酿酒酵母工程菌;
2)建立葡萄糖二酸规模化生产的生物过程与工艺。
图1 酿酒酵母细胞中葡糖二酸生物合成途径构建策略
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