
联系人: 山东师范大学
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一、成果概述:(简要说明成果是什么,以便技术受让方了解项目概况)
二、技术特点及技术指标:(突出与国内外同行的比较优势或区别)
三、应用领域:(主要面向的行业产业、技术已在***领域应用的概述以及取得成效,还可在*火*领域应用的前景等)
四、投入需求:(需要技术需求方投入的资金、场地、设施等条件)
1)对已筛选的耐盐甜高粱品种和盐敏感品种,进行高通量表达谱测序,对比筛选控制甜高粱耐盐(拒盐)的关键基因。
以本实验室筛选出的耐盐品种(M-81E)和盐敏感品种(罗马)为材料,对生长14天的幼苗,此时第二片真叶已经发育成熟,经150 mM NaCl处理(NaCI)和非盐处理(CK) 48小时后,分别取叶和根作为实验材料。经提取纯化irRNA后,利用Illlumina Hiseq 2000测序仪进行高通量表达谱测序。
由于甜高粱已具有完备的基因组测序及注释信息,所以将我们获得的表达谱读 段数直接与甜高粱基因组进行比对,分别定位耐盐品种和盐敏感品种在4个取材部 位的差异表达基因,并进行基因表达量的定量分析和可变剪切分析。通过不同品种 在CK和NaCl处理下,在相同取材部分的差异表达基因分析,筛选控制耐盐品种耐 盐(拒盐)的关键基因,并揭示这些基因在甜高粱耐盐(拒盐)中的主要作用。
2)在已筛选的甜高粱耐盐(拒盐)关键候选基因的基础上,进一步验证候选基因在控制甜高粱耐盐(拒盐)中的重要作用。
针对筛选出的甜高粱耐盐(拒盐)候选基因,经与已有研究进一步筛选与耐盐 (拒盐)密切相关的基因,经Real-time PCR和体外全长克隆后,构建沉默或过表载体,采用现已成熟的甜高粱农杆菌介导的遗传转化体系,转化获得这些基因沉默 或过量表达的转基因植株,对转基因植株用不同浓度的NaCl处理,测定其耐盐指标, 通过观察这些转基因植株的表型变化,验证候选基因的关键功能,从而筛选出控制 甜高粱耐盐(拒盐)的关键基因。
3)优化盐碱地耐盐甜高粱栽培技术,为黄河三角洲推广种植耐盐高糖甜高粱提供技术支撑和指导服务。
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