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本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种碱性蛋白酶突变体及其基因、工程菌、制备方法和应用。本发明通过提取克劳氏芽孢杆菌基因组DNA,经PCR扩增得到野生型碱性蛋白酶基因序列,将扩增得到的野生型碱性蛋白酶基因通过易错PCR进行随机突变,通过高通量筛选后获得了若干个高活力碱性蛋白酶基因,再将这些高活力碱性蛋白酶基因进行DNA改组,通过筛选后获得八个更高活力的碱性蛋白酶突变体基因。将这八个突变体基因构建重组载体并在枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、克劳氏芽孢杆菌中成功表达,得到产酶活力提高的重组菌株,进一步通过发酵工艺优化获得新型碱性蛋白酶。
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